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    基因測序儀的技術原理

    日期:2023-10-29瀏覽:543次

    基因測序技術也稱作dna測序技術,即獲得目的dna片段堿基排列順序的技術,獲得目的dna片段的序列是進一步進行分子生物學研究和基因改造的基礎。
     
    基因測序儀(即DNA測序儀),是一臺能自動灌膠、自動進樣、自動數據收集分析等全自動電腦控制的測定基因片段的高檔精密儀器。
     
    技術原理:
     
    在分子生物學研究中,基因的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。用于測序的技術主要有Sanger等。發明的雙脫氧鏈末端終止法。Sanger法是根據核苷酸在某一固定的點開始,隨機在某一個特定的堿基處終止,產生A,T,C,G四組不同長度的一系列核苷酸,然后在尿素變性的PAGE膠上電泳進行檢測,從而獲得DNA序列。Sanger測序法得到了廣泛的應用。
     
    Sanger法測序的原理就是利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物,直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成,每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸,并混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3'-OH基團,使延長的寡聚核苷酸選擇性地在G、A、T或C處終止,終止點由反應中相應的雙脫氧而定。

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